| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1154738C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.06.23 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN97191782.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 1997.01.22 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 新的鑒定刺激STF-1在胰島細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的化合物的方法 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C12N15/63 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N15/63;C12N15/00;C12N5/00 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1996.1.22 US 60/010,414 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 研究發(fā)展基金會(huì) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | M·R·蒙特米尼;S·夏爾馬 |
| 地址 | 美國(guó)內(nèi)華達(dá)州 |
| 頒證日 | 2004.06.23 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | PCT/US1997/001033 1997.1.22 |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | 1998.07.20 |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 上海專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 陳文青 |
| 國(guó)省代碼 | 美國(guó);US |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種測(cè)定被測(cè)化合物刺激胰島細(xì)胞誘導(dǎo)STF-1轉(zhuǎn)錄的能力的方法，它包括以下步驟：提供包含操作性相連的STF-1增強(qiáng)子，STF-1啟動(dòng)子和報(bào)道基因的載體，所述STF-1增強(qiáng)子是SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.2或它們的具有STF增強(qiáng)子活性的片段，所述STF-1啟動(dòng)子包含選自S1，S2或S3的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，所述S1，S2或S3分別位于翻譯起始位置上游第91、107和120/125位核苷酸，所述報(bào)道基因的表達(dá)使胰島宿主細(xì)胞具有可測(cè)信號(hào)；在體外將所述載體轉(zhuǎn)移到所述宿主細(xì)胞內(nèi)；在被測(cè)化合物存在下培養(yǎng)所述的宿主細(xì)胞；分析所述被測(cè)化合物刺激所述宿主細(xì)胞產(chǎn)生所述可檢測(cè)信號(hào)的能力，其中有所述信號(hào)的存在表示所述被測(cè)化合物刺激胰島細(xì)胞誘導(dǎo)了STF-1的轉(zhuǎn)錄，而沒(méi)有所述信號(hào)則表示所述的被測(cè)化合物沒(méi)有刺激胰島細(xì)胞誘導(dǎo)STF-1的轉(zhuǎn)錄。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了兩種實(shí)施方式。其一是檢測(cè)能夠誘導(dǎo)STF-1轉(zhuǎn)錄的化合物的方法。分離出表達(dá)STF-1/lacZ融合基因的胰島細(xì)胞，通過(guò)將待測(cè)化合物加入表達(dá)STF-1/lacZ的細(xì)胞來(lái)測(cè)定各種化合物的作用。然后利用比色法定量測(cè)定對(duì)照細(xì)胞和經(jīng)處理細(xì)胞內(nèi)的lacZ活性。利用此方法可以篩選大量化合物并可以方便地鑒定出STF-1誘導(dǎo)性化合物。其二是在體內(nèi)用STF-1啟動(dòng)子標(biāo)記產(chǎn)生胰島素的胰島細(xì)胞的方法。其中，綠熒光蛋白(GFP)被用作指示物。用轉(zhuǎn)基因方法將STF-1-綠熒光蛋白引入豬體內(nèi)就能夠高效迅速地從胰腺中回收產(chǎn)生胰島素的細(xì)胞。 |
| 國(guó)際公布 | WO1997/026360 英 1997.7.24 |
