公開(公告)號
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CN1526730A
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公開(公告)日
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2004.09.08
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申請(專利)號
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CN03158298.2
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申請日期
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2003.09.23
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專利名稱
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紅細(xì)胞增殖因子及其生產(chǎn)工藝
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主分類號
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C07K14/475
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分類號
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C07K14/475;C07K14/505;A61K35/16;A61K38/18;A61K9/19;A61P7/06
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南京賽爾金生物醫(yī)學(xué)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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金以豐;黃寧;黃斌
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地址
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211800江蘇省南京市浦口經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)天浦路8號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種紅細(xì)胞增殖因子其特征在于從血漿中分離,命名為紅細(xì)胞增殖因子Erythrocyte proliferating factor縮寫EPF。分子量經(jīng)質(zhì)譜測定50000~52000 Dalton,等電點(diǎn)3.8~4.2。具有體外促進(jìn)正常小鼠網(wǎng)紅細(xì)胞生成的作用。EPO單抗不能與EPF結(jié)合,螢光標(biāo)記證明EPF與EPO有各自不同的受體及靶細(xì)胞,亦有少量細(xì)胞同時有兩種受體。
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摘要
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本發(fā)明屬于生化分離純化技術(shù)領(lǐng)域。從血漿中發(fā)現(xiàn)一種新的生血因子,分子量50000~52000左右,等電點(diǎn)3.8~4.2,具有促進(jìn)紅細(xì)胞生成的作用,命名為紅細(xì)胞增殖因子(Erythrocyte proliferating factor,EPF)。它與EPO單抗不能結(jié)合,氨基酸序列測定N端15個氨基酸經(jīng)與蛋白序列庫對比,與維生素D結(jié)合蛋白(DBP)相同,但胰蛋白酶酶切圖譜與DBP完全不同,等電點(diǎn)與DBP的p I 5.2相去甚遠(yuǎn),而且DBP不具有促進(jìn)網(wǎng)紅細(xì)胞生成的生物活性,初步確定EPF為DBP家族中的一個新成員。從血漿分離白蛋白和球蛋白以后的乙醇沉淀中,通過溶解、離心、超濾,DEAE纖維素層析和凝膠過濾得到一個部分純化的EPF,可制成凍干制劑,有明顯的促紅細(xì)胞生成作用。EPF與EPO聯(lián)合使用有明顯的協(xié)同效應(yīng),促進(jìn)網(wǎng)紅細(xì)胞生成的作用遠(yuǎn)超過EPF和EPO單獨(dú)使用的效果。EPF蛋白無增加血液黏度的作用,亦未見明顯毒副作用。是一種天然的,人原的,安全有效的,促紅細(xì)胞生成的生血因子。
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國際公布
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