| 公開(公告)號 | CN1526829A |
| 公開(公告)日 | 2004.09.08 |
| 申請(專利)號 | CN03113853.5 |
| 申請日期 | 2003.03.04 |
| 專利名稱 | 病原微生物診斷型基因芯片的快速檢測方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍基因工程研究所 |
| 發(fā)明(設計)人 | 馬文麗;鄭文嶺;石嶸 |
| 地址 | 510515廣東省廣州市同和第一軍醫(yī)大學分子生物學研究所 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 廣州知友專利代理有限公司 |
| 代理人 | 邵毓琴 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權項 | 病原微生物診斷型基因芯片的快速檢測方法，包括以下步驟：(1)玻片的準備；(2)探針準備：采用PCR擴增病原體全基因組的各個基因和特異性片段，探針長度從數(shù)百到數(shù)千堿基不等，濃度在0.25～0.5μg/μL；(3)芯片制備：采用基因芯片點樣儀進行點樣；(4)打印后處理；(5)樣品的處理：在PCR擴增過程中，Cy5-dUTP進行摻入標記，在標記前或標記后引入限制性酶切，使獲得片段長度在200～600bps之間；(6)雜交：2×雜交緩沖液的配方為60％甲酰胺、12×SSC、0.24％SDS；(7)雜交后清洗；(8)掃描檢測。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種病原微生物診斷型基因芯片的快速檢測方法，包括以下步驟：(1)玻片的準備；(2)探針準備：采用PCR擴增病原體全基因組的各個基因和特異性片段，探針長度從數(shù)百到數(shù)千堿基不等，濃度在0.25～0.5μg/μL；(3)芯片制備：采用基因芯片點樣儀進行點樣；(4)打印后處理；(5)樣品的處理：在PCR擴增過程中，Cy5-dUTP進行摻入標記，在標記前或標記后引入限制性酶切，使獲得片段長度在200～600bps之間；(6)雜交：2×雜交明沖液的配方為60％甲酰胺、12×SSC、0.24％SDS；(7)雜交后清洗；(8)掃描檢測。本發(fā)明具有標記效率高、雜交檢測結果穩(wěn)定、雜交時間大大病短等優(yōu)點，可將雜交時間從傳統(tǒng)的16～20小時縮短到10分鐘，尤其適用于臨床感染性疾病的診斷。 |
| 國際公布 |
