公開(公告)號 | CN1544635A |
公開(公告)日 | 2004.11.10 |
申請(專利)號 | CN200310108792.6 |
申請日期 | 2003.11.21 |
專利名稱 | 糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G酰化酶在大腸桿菌中的高效表達(dá) |
主分類號 | C12N15/52 |
分類號 | C12N15/52;C12N15/63;C12N1/20 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 袁中一;楊志建;蔡謹(jǐn) |
地址 | 200031上海市岳陽路320號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
代理人 | 肖劍南 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權(quán)項(xiàng) | 含有糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;富,即AfPGA基因,及其信號肽的重組表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga,其特征在于,所述表達(dá)質(zhì)粒由trc啟動(dòng)子、AfPGA基因及其信號肽、四環(huán)素抗性基因和p15a復(fù)制子連接而成。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;(AfPGA)高效表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga的構(gòu)建方法;利用該方法得到的質(zhì)粒psmlfpga轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主DH5α,得到大腸桿菌基因工程菌株CGMCC No.1023,其不需誘導(dǎo)便能高效表達(dá)AfPGA;本發(fā)明還公開了一種用于上述大腸桿菌基因工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方,其采用糊精或淀粉作為發(fā)酵培養(yǎng)基主要碳源,可以大大提高重組蛋白的生產(chǎn)率;經(jīng)搖瓶發(fā)酵,青霉素G酰化酶在DH5α/psmlfpga中的表達(dá)水平可達(dá)3500U/L。 |
國際公布 |