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糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;冈诖竽c桿菌中的高效表達(dá)

公開(公告)號 CN1544635A  
公開(公告)日 2004.11.10  
申請(專利)號 CN200310108792.6  
申請日期 2003.11.21  
專利名稱 糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G酰化酶在大腸桿菌中的高效表達(dá)  
主分類號 C12N15/52  
分類號 C12N15/52;C12N15/63;C12N1/20  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 袁中一;楊志建;蔡謹(jǐn)  
地址 200031上海市岳陽路320號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海智信專利代理有限公司  
代理人 肖劍南  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 含有糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;富,即AfPGA基因,及其信號肽的重組表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga,其特征在于,所述表達(dá)質(zhì)粒由trc啟動(dòng)子、AfPGA基因及其信號肽、四環(huán)素抗性基因和p15a復(fù)制子連接而成。  
摘要 本發(fā)明公開了一種糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G;(AfPGA)高效表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga的構(gòu)建方法;利用該方法得到的質(zhì)粒psmlfpga轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主DH5α,得到大腸桿菌基因工程菌株CGMCC No.1023,其不需誘導(dǎo)便能高效表達(dá)AfPGA;本發(fā)明還公開了一種用于上述大腸桿菌基因工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方,其采用糊精或淀粉作為發(fā)酵培養(yǎng)基主要碳源,可以大大提高重組蛋白的生產(chǎn)率;經(jīng)搖瓶發(fā)酵,青霉素G酰化酶在DH5α/psmlfpga中的表達(dá)水平可達(dá)3500U/L。  
國際公布  
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