公開(公告)號(hào)
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CN1545553A
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公開(公告)日
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2004.11.10
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02805619.1
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申請(qǐng)日期
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2002.02.01
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專利名稱
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生產(chǎn)重組胰蛋白酶的方法
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主分類號(hào)
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C12N15/57
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分類號(hào)
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C12N15/57;C12N9/76;C12N1/19
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2001.2.1 EP 01102342.1
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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R·米勒;S·格萊澤;F·蓋佩爾;J-P·塔爾霍費(fèi)爾;B·雷克塞爾;C·施奈德;M·拉特卡;S·倫寧;H·?耸┨┮;C·吉塞爾
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地址
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瑞士巴塞爾
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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PCT/EP2002/001072 2002.2.1
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進(jìn)入國(guó)家日期
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2003.08.27
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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吳亦華
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國(guó)省代碼
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瑞士;CH
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主權(quán)項(xiàng)
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重組生產(chǎn)胰蛋白酶的方法,該方法包含步驟:a)用重組核酸轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞,該核酸編碼一種由宿主可分泌的形式的前肽序列中具有腸激酶識(shí)別位點(diǎn)的胰蛋白酶原,b)在一定條件下培養(yǎng)宿主細(xì)胞,該條件使得重組核酸能夠表達(dá)且表達(dá)產(chǎn)物能夠分泌到培養(yǎng)基中,該條件是為了基本防止前肽序列的自身催化性切割而選擇的,c)從培養(yǎng)基中分離表達(dá)產(chǎn)物,d)切割前肽序列以形成活性胰蛋白酶且e)從活性胰蛋白酶中可選擇地分離未切割的胰蛋白酶原分子。
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摘要
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本發(fā)明涉及生產(chǎn)來(lái)自豬胰的重組胰蛋白酶的方法,該胰蛋白酶在巴斯德畢氏酵母(Pichia pastoris)中是可溶的且分泌到培養(yǎng)基中,其中在pH 3.0-4.0的表達(dá)防止了胰蛋白酶原到β胰蛋白酶的活化和β胰蛋白酶由胰蛋白酶自溶為ε胰蛋白酶及由此變?yōu)槭Щ畹碾摹?
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國(guó)際公布
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WO2002/061064 德 2002.8.8
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