公開(公告)號
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CN1563088A
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公開(公告)日
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2005.01.12
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申請(專利)號
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CN200410008799.5
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申請日期
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2004.03.19
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專利名稱
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一種抗流行性感冒特異性復(fù)合IgY及其新型制劑
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主分類號
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C07K16/10
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分類號
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C07K16/10;A61K39/395;A61P31/16
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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雅臣藥業(yè)集團(tuán)(遠(yuǎn)東)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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包晟;胡義結(jié);楊榮鑑
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地址
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518000廣東省深圳市福田區(qū)八卦三路深藥大廈768室
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京太兆天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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張韜
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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一種抗流感病毒的特異性IgY,其特征在于該特異性IgY是經(jīng)以下方法制備而成:選定兩種流行性感冒病毒A型流感病毒H3N2株、H1N1株及H2N2株和B型流感病毒B-Vactoria株;將上述四種病毒株分別采用常規(guī)雞胚尿囊法,在雞胚尿囊中培養(yǎng);收取含有病毒的尿囊液,然后以雞紅細(xì)胞法粗提;再用蔗糖密度梯度超速離心法或凝膠柱層析法純化病毒,即分別得到提純的H3N2、H1NH2N2和B-Vactoria4種流感病毒懸浮液;分別取提純的H3N2、H1NH2N2和B-Vactoria4種流感病毒懸浮液,分別加入20%十二烷基硫酸鈉,最終濃度為2.0%,于37℃裂解30分鐘,即分別得到上述4種流感病毒裂解液;將這4種流感病毒裂解液按1.0∶0.5∶0.5∶1.0的比例混合均勻,制成混合裂解液,再按1∶1的比例在混合裂解液中加入福氏佐劑,置入高速勻漿器中,以8,000rpm高速勻化,形成油包水液體,即制成含多種流感病毒裂解成份的病毒復(fù)合抗原;以這種復(fù)合抗原免疫健康的產(chǎn)蛋母雞,每隔二周再強(qiáng)化注射一次,共計免疫三次;第一次注射后第20天開始檢取免疫蛋,將其用流動水沖凈,75%乙醇消毒,晾干破碎蛋殼,以蛋黃篩濾去蛋清,留取蛋黃加5倍蒸餾水?dāng)噭,?.0NHCI調(diào)pH至5.5-6.0,攪拌均勻,2-6℃靜置過夜,于10,000rpm離心20分鐘,取上清進(jìn)行超濾濃縮10-20倍;繼而加入2.0%海藻酸鈉液,至終濃度為0.1%,攪拌至出現(xiàn)渾濁;再加入2.0%CaCI2液,至終濃度為0.1%,攪拌均勻,4℃過夜10小時;8,000rpm離心20分鐘,取上清;0.45μm膜串連0.22μm膜過濾除菌,UltiporVFTMDV50除病毒過濾器除去病毒;冷凍干燥;即制得抗流感病毒特異性IgY粗提物;將以上IgY粗提物先后過離子交換樹脂柱和凝膠層析柱層析,即制得抗流感病毒特異性IgY純品。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種抗流感病毒各個多肽抗原以及抗繼發(fā)感染細(xì)菌的特異性復(fù)合IgY及其制備方法;本發(fā)明同時還提供了一種天然、安全又具有特效作用的、預(yù)防和治療流行性感冒的抗流感病毒特異性IgY和/或抗繼發(fā)感染特異性IgY口噴劑、鼻噴劑、滴鼻劑、滴眼劑以及各種注射劑。這些特異性的IgY完全可以從根本上預(yù)防和治療由易變異的流感病毒所引起的流行性感冒,因此,可以克服“流感疫苗”固有的、對變異了的流感病毒沒有作用的弱點,比“流感疫苗”更方便、更經(jīng)濟(jì)、更安全、更有效。
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國際公布
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