高效表達(dá)人胰高血糖素樣肽-1的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
公開(公告)號
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CN1587385A
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公開(公告)日
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2005.03.02
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申請(專利)號
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CN200410054397.9
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申請日期
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2004.09.08
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專利名稱
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高效表達(dá)人胰高血糖素樣肽-1的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用
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主分類號
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C12N1/21
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分類號
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C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;C12N15/66;C07H21/00;C12P21/02
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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華東師范大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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黃靜;吳自榮;左翼;徐進(jìn);樓旻;徐偉東
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地址
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200062上海市中山北路3663號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海德昭專利事務(wù)所
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代理人
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程宗德;石昭
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種高效表達(dá)人胰高血糖素樣肽-1的基因工程菌,其特征在于,該基因工程菌是攜帶重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3),所述的重組質(zhì)粒是含GLP-1基因的質(zhì)粒pET32a(+),所述的重組質(zhì)粒含GLP-1基因的串?dāng)?shù)為1~16串,其中,GLP-1基因是入胰高血糖素樣肽-1基因。
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摘要
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一種高效表達(dá)人胰高血糖素樣肽-1的基因工程菌及其構(gòu)建方法和應(yīng)用,屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。該基因工程菌是攜帶含人胰高血糖素樣肽-1基因,即GLP-1基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3)。該基因工程菌的構(gòu)建方法是在DNA水平上,將含有人胰高血糖素樣肽-1基因的DNA序列串聯(lián)為多聚體,構(gòu)建成表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,獲得高效表達(dá)人胰高血糖素樣肽-1的基因工程菌。用該基因工程菌,通過液體培養(yǎng)、純化制得的人胰高血糖素樣肽-1融合蛋白和制備人胰高血糖素樣肽-1三步可生產(chǎn)人胰高血糖素樣肽-1。本發(fā)明有以下優(yōu)點: 1.構(gòu)建基因工程菌的人胰高血糖素樣肽-1的表達(dá)量高;2.用該基因工程菌生產(chǎn)人胰高血糖素樣肽-1時,純化步驟簡便,得率高,生產(chǎn)成本低。
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國際公布
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