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利用輔助肽制造肽的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1198937C  
公開(kāi)(公告)日 2005.04.27  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN99800113.9  
申請(qǐng)日期 1999.01.29  
專(zhuān)利名稱(chēng) 利用輔助肽制造肽的方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N15/62  
分類(lèi)號(hào) C12N15/62;C12P21/02;C12P21/06;A61K38/28;C12N1/21;C12N5/10  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.1.30 JP 32272/1998  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 第一三得利制藥株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 大末和廣;田雅之;鈴木雄司  
地址 日本東京  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/JP1999/000406 1999.1.29  
進(jìn)入國(guó)家日期 1999.09.30  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 隗永良  
國(guó)省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 具有所需生物學(xué)活性的肽的制造方法,該方法包括如下工序:工序(1):利用含有編碼在附加了輔助肽的目的肽基礎(chǔ)上又進(jìn)一步附加了保護(hù)肽的融合蛋白的堿基序列的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化細(xì)胞,然后培養(yǎng)該轉(zhuǎn)化細(xì)胞,從該培養(yǎng)物中收集上述融合蛋白;這里,在(a)所述輔助肽與目的肽之間、以及(b)保護(hù)肽與構(gòu)成附加了輔助肽的目的肽的該輔助肽或該目的肽之間存在斷裂位點(diǎn),工序(2):從該融合蛋白中裂解分離附加了輔助肽的目的肽與保護(hù)肽,按照要求純化附加了輔助肽的目的肽;工序(3):從工序(1)或工序(2)得到的附加了輔助肽的目的肽中裂解分離輔助肽與目的肽,按照需要純化目的肽,以及工序(4):對(duì)在工序(3)中得到的目的肽進(jìn)行純化。  
摘要 在通過(guò)基因重組制造具有生物學(xué)活性的目的肽過(guò)程中,其特征是在目的肽上附加了輔助肽后使其表達(dá)。通過(guò)這樣操作調(diào)整了等電點(diǎn),可以防止回收和純化工序中的凝集,提高離子交換層析的回收率,提高在使目的肽在以與其它肽形成的融合蛋白形式表達(dá)的情況下通過(guò)酶裂解使目的肽游離之際酶反應(yīng)時(shí)的該融合蛋白的溶解度,提高在目的肽必須通過(guò)酶修飾的情況下酶反應(yīng)時(shí)的該肽的溶解度,這樣以來(lái)可以使目的肽的純化效率以及收率提高。  
國(guó)際公布 WO1999/038984 日 1999.8.5  
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