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胃癌特異性納米疫苗的制備方法

公開(公告)號 CN1647821A  
公開(公告)日 2005.08.03  
申請(專利)號 CN200410073124.9  
申請日期 2004.09.29  
專利名稱 癌特異性納米疫苗的制備方法  
主分類號 A61K39/00  
分類號 A61K39/00;A61P35/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 吳開春;師瑞;吳道澄;寧小萱;丁杰;樊代明  
地址 710032陜西省西安市長樂西路17號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 西安通大專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 李鄭建  
國省代碼 陜西;61  
主權(quán)項 一種胃癌特異性納米疫苗的制備方法,其特征在于,將人工合成的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpGODN1645采用納米乳劑包封,獲得胃癌特異性納米疫苗;具體包括以下步驟:1)在雙蒸水中分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.4%的司盤-80、土溫-80;混合均勻得到水相A;2)在另一加入雙蒸水的大試管中,先加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的大豆油,然后各加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2%的胃癌特異性抗原MG7模擬表位多肽和免疫佐劑CpGODN,最后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.4%的司盤-80,混合均勻,得到油相B;3)在3000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢柘,將油相B逐滴加入到水相A中,滴加完畢后將混合物移至真空高速剪切乳化機(jī)上,在0.7Kpa真空下,以23000轉(zhuǎn)/分剪切40分鐘,2次;4)剪切后室溫冷卻20分鐘,得到乳白色帶乳光液體,冰浴下超聲3分鐘后再用膜過濾、除菌后4℃保存,即得到20nm-30nm的胃癌特異性納米疫苗。  
摘要 本發(fā)明公開了胃癌特異性納米疫苗的制備方法。本發(fā)明利用生物性納米乳劑作為體內(nèi)藥物運(yùn)輸載體,以胃癌特異性多肽抗原MG7為免疫抗原,以含有CpG基序的寡核甘酸(CpG ODN)為免疫佐劑,采用磁力超聲法構(gòu)建共包封有MG7-Ag模擬表位多肽與CpG ODN的納米疫苗。經(jīng)高效液相色譜分析,電鏡觀察以及離心等方法鑒定表明所構(gòu)建的納米疫苗粒徑控制在20-30nm并具有較高的包封率和穩(wěn)定性。疫苗免疫接種后,可誘導(dǎo)小產(chǎn)生抗MG7-Ag特異性抗體以及一定數(shù)量的特異性CTL分泌IFNγ,抗原-佐劑共包封組優(yōu)于單表位抗原單獨包封組和其他對照組。腫瘤攻擊后,共包封疫苗免疫組小鼠成瘤體積明顯小于對照組。這一基因疫苗在胃癌的免疫治療研究,胃癌特異性疫苗的研制方面將具有巨大的潛在價值。  
國際公布  
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