| 公開(公告)號 | CN1657631A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.24 |
| 申請(專利)號 | CN200410061236.2 |
| 申請日期 | 2004.11.30 |
| 專利名稱 | 表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒及其制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/861 |
| 分類號 | C12N15/861;A61K48/00;C12N15/66;C12N7/01 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 汪道文;肖嘯;趙春霞;汪培華 |
| 地址 | 430030湖北省武漢市解放大道1095號轉(zhuǎn)同濟(jì)醫(yī)院內(nèi)科汪道文 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 武漢開元專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 王和平 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒，該重組腺相關(guān)病毒由天然狀態(tài)的腺相關(guān)病毒和腺病毒經(jīng)分子生物學(xué)方法人工剪切、修飾和加工而成，該載體系統(tǒng)包括包裝質(zhì)粒pXX2，輔助質(zhì)粒pXX6，真核表達(dá)載體pXXUF1和pXXUF3，并在真核表達(dá)載體pXXUF1內(nèi)反向插入了人類受磷蛋白基因編碼序列，1)包裝質(zhì)粒pXX2：它含有編碼腺相關(guān)病毒Rep蛋白和Cap蛋白的編碼序列，并在上游和下游各插入一個p5啟動子，使表達(dá)效率可以提高15倍；2)輔助質(zhì)粒pXX6：其刪除了腺病毒的致病基因序列，保留了腺病毒E1A、E2A和VA1RNA基因，它們表達(dá)的蛋白質(zhì)可發(fā)揮輔助作用以刺激AAV基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，保證AAV的產(chǎn)量；3)真核表達(dá)載體pXXUF1：所用的是CMV啟動子，有較強(qiáng)的表達(dá)效率，其含有NotI多克隆位點(diǎn)，可以連接不同的目的基因，pXXUF1反向連接人受磷蛋白基因，該載體含有rAAV轉(zhuǎn)基因表達(dá)所必須的末端ITRs重復(fù)序列，負(fù)責(zé)病毒的復(fù)制和病毒外殼的包被并攜帶目的基因。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒及其制備方法，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，用于心力衰竭及其他相關(guān)疾病的基因治療。該重組腺相關(guān)病毒由天然狀態(tài)的腺相關(guān)病毒和腺病毒經(jīng)分子生物學(xué)方法人工剪切、修飾和加工而成，該載體系統(tǒng)包括包裝質(zhì)粒pXX2，輔助質(zhì)粒pXX6，真核表達(dá)載體pXXUF1和pXXUF3，并在真核表達(dá)載體pXXUF1內(nèi)反向插入了人類受磷蛋白基因編碼序列。本發(fā)明的表達(dá)人類反義受磷蛋白基因的重組腺相關(guān)病毒制備方法成功，所制備的重組腺相關(guān)病毒滴度高，能驅(qū)動目的基因長期有效的表達(dá)，可以用于心梗及其他相關(guān)性疾病所致心力衰竭的治療。 |
| 國際公布 |
