| 公開(公告)號 | CN1231595C |
| 公開(公告)日 | 2005.12.14 |
| 申請(專利)號 | CN00121500.0 |
| 申請日期 | 2000.07.26 |
| 專利名稱 | 通過分子伴侶的共分泌制備天然折疊的和分泌的蛋白質(zhì)的方法 |
| 主分類號 | C12P21/00 |
| 分類號 | C12P21/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1999.7.29 EP 99114811.5 |
| 申請(專利權(quán))人 | 霍夫曼-拉羅奇有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 多羅西婭·安布羅修斯;賴納·魯?shù)婪?約爾格·舍夫納;伊麗莎白·施瓦茨 |
| 地址 | 瑞士巴塞爾 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 胡交宇 |
| 國省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種制備含有兩個(gè)或幾個(gè)通過二硫鍵連接的半胱氨酸的天然折疊的真核多肽的方法，該方法包括：a)培養(yǎng)原核細(xì)胞，其中，所說的原核細(xì)胞含有一種表達(dá)載體，該載體編碼所說的在N-末端含有一種原核信號序列的多肽，b)將該多肽分泌至培養(yǎng)基中，c)切割信號序列，并從培養(yǎng)基中分離該多肽，其中，在所說的原核細(xì)胞中還表達(dá)一種編碼sHsp型的小熱休克蛋白質(zhì)或者一種具有分子量約40kDa的Hsp40型的熱休克蛋白質(zhì)作為胞質(zhì)分子伴侶的核酸，并且該分子伴侶被分泌至周質(zhì)中，其先決條件是，培養(yǎng)是在沒有精氨酸或一種通式IR2-CO-NRR1(I)的化合物的存在下進(jìn)行的，其中，R和R1表示氫或一種飽和的或不飽和的支鏈或非支鏈的C1-C4烷基鏈和R2表示氫，NHR1或一種飽和的或不飽和的支鏈或非支鏈的C1-C3烷基鏈和所述培養(yǎng)是用以0.1-15mmol/l的濃度添加到培養(yǎng)基中的還原硫醇試劑進(jìn)行的。 |
| 摘要 | 一種制備含有兩個(gè)或幾個(gè)通過二硫鍵連接的半胱氨酸的天然折疊的真核多肽的方法，該方法包括：a)培養(yǎng)原核細(xì)胞，其中，所說的原核細(xì)胞含有一種表達(dá)載體，該載體編碼所說的在N-末端含有一種原核信號序列的多肽，b)將該多肽分泌至周質(zhì)中或培養(yǎng)基中，c)切割信號序列，并從周質(zhì)或培養(yǎng)基中分離該多肽，其中，在所說的原核細(xì)胞中還表達(dá)一種編碼一種分子伴侶的核酸，并且該分子伴侶被分泌至周質(zhì)中，該方法適用于在原核細(xì)胞中高產(chǎn)率地重組生產(chǎn)。 |
| 國際公布 |
