| 公開(公告)號 | CN1238492C |
| 公開(公告)日 | 2006.01.25 |
| 申請(專利)號 | CN02108974.4 |
| 申請日期 | 2002.04.16 |
| 專利名稱 | 酵母重組株及IFNα-2b干擾素的純化方法 |
| 主分類號 | C12N1/19(2006.01)I |
| 分類號 | C12N1/19(2006.01)I;C12N15/21(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C07K14/56(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 海南海梁生物高科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 梁國棟;周 鵬;夏中寧 |
| 地址 | 570216海南省海口市金盤工業(yè)區(qū)金盤路17號嘉海大廈三樓 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 海南;66 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種酵母重組株，其特征在于將克隆修飾去除了啟始密碼子ATG的人α-2b干擾素基因huIFN-2b插入pGAPZα-A之GAP啟動子/α-factor信號肽下游xhoI/xbaI位點(diǎn)，同時對相應(yīng)載體刪除Kex2(Lys-Arg)位點(diǎn)之后的Ste13位點(diǎn)(Glu-Ala-Glu-Ala)，構(gòu)建成人α-2b干擾素分泌型表達(dá)載體huIFNα-2b/pGAPZα-A，轉(zhuǎn)入畢赤氏酵母(Pichiapastoris)的菌株GS115，構(gòu)建成分泌型人α-2b干擾素重組酵母工程菌株huIFNα-2b/pGAPZα-A/GS115。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分泌表達(dá)α-2b干擾素的酵母工程菌株IFNα-2b/pGAPZα-A/GS115構(gòu)建的關(guān)鍵技術(shù)、構(gòu)建結(jié)果及利用它來生產(chǎn)α-2b干擾素的純化方法。本發(fā)明采用酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)取代大腸桿菌包涵體表達(dá)系統(tǒng)，目標(biāo)蛋白α-2b干擾素不需要復(fù)性，其生物比活性可達(dá)到1.0×109單位/毫克蛋白，低毒副作用；在純化過程中，不需要價值昂貴的單抗柱，即可從發(fā)酵液中提取獲得純度達(dá)95％以上的目標(biāo)蛋白α-2b干擾素，降低了生產(chǎn)成本。 |
| 國際公布 |
