| 公開(公告)號 | CN1814778A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.09 |
| 申請(專利)號 | CN200510022190.8 |
| 申請日期 | 2005.12.02 |
| 專利名稱 | 一種醫(yī)用膠原蛋白粉劑的制備方法 |
| 主分類號 | C12P21/02(2006.01)I |
| 分類號 | C12P21/02(2006.01)I;A61L15/32(2006.01)I;A61L31/04(2006.01)I;A61L33/12(2006.01)I;A61K47/42(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 成都佰樂金生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 但衛(wèi)華;曾 睿;林 海;但年華;米貞健 |
| 地址 | 610065四川省成都市高新區(qū)高朋大道5號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 成都科海專利事務(wù)有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 鄧繼軒 |
| 國省代碼 | 四川;51 |
| 主權(quán)項 | 醫(yī)用膠原蛋白粉的制備方法，其特征在于該制備方法含有以下步驟： (1)預(yù)處理：取純化豬皮100重量份，放入轉(zhuǎn)鼓中，加入溫度為32-40℃的去離子水300-600重量份，氯化鈉3-10重量份，轉(zhuǎn)動20-150min；控干廢液，加入溫度為32-40℃的去離子水300-600重量份，平平加1-5重量份，轉(zhuǎn)動20-150min；控干廢液，加入去離子水300-600重量份，轉(zhuǎn)動30-40min；控干廢液，加入去離子水300-600重量份，轉(zhuǎn)動30-40min； (2)分割：從轉(zhuǎn)鼓中取出預(yù)處理過的皮坯，離心機脫水，然后分割成2-6×2-6cm的小塊； (3)凍干：將小皮塊放入凍干機中，降溫參數(shù)定為下降2℃/min，直至冷阱溫度降至-34℃，抽真空至45-150mbar保持24h，然后緩慢升溫8-15h，使冷阱溫度升至15-30℃，完成凍干過程； (4)粉碎：在碎皮機上將小皮塊粉碎成小皮粒，其粒度要求為：0.5-1.0×0.5-1.0mm； (5)浸酸：取100重量份的干燥小皮粒放于轉(zhuǎn)鼓中，加入1000-5000重量份的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸鹽，pH為7.4的緩沖液，用冰塊調(diào)節(jié)鼓內(nèi)溫度達到4-15℃，間歇轉(zhuǎn)動，轉(zhuǎn)動3min/30min×2-9次，然后連續(xù)轉(zhuǎn)動10min，再間歇轉(zhuǎn)動，轉(zhuǎn)動3min/30min×1-6次，靜置30min，用耐酸真空泵吸出轉(zhuǎn)鼓中上層清液，再向轉(zhuǎn)鼓中加入HAc，調(diào)節(jié)pH＝1.8-2.8，轉(zhuǎn)鼓內(nèi)溫度為4-15℃，靜置浸泡1-4h； (6)酶消化：調(diào)節(jié)并保持轉(zhuǎn)鼓內(nèi)溫度達到4-15℃，加入0.5-4.0重量份的復(fù)合酶皮膠原處理劑E，連續(xù)轉(zhuǎn)動4-12h； (7)一次鹽析：用耐酸真空泵將酶消化液泵入離心機中進行離心分離，并用耐酸真空泵將上清液泵入轉(zhuǎn)鼓中，用NaOH溶液調(diào)整清液的pH值至7.2-8.2，轉(zhuǎn)動中，緩慢加入(NH4)2SO4，使其濃度達到0.8-1.8mol/L，靜置6-14h； (8)酸溶解：用耐酸真空泵將鹽析液泵入離心機中進行離心分離，取離心機中的沉淀物，棄上清液，并將離心機中的沉淀物移入轉(zhuǎn)鼓中的事先已經(jīng)配制好的0.1-1.2MHAc溶液中，轉(zhuǎn)動10-40min，獲得粗制膠原蛋白溶液； (9)二次鹽析：將粗制膠原蛋白溶液用酸調(diào)節(jié)pH為1.8-2.8，在離心機中離心分離，用耐酸真空泵將此清液泵入另一轉(zhuǎn)鼓中，轉(zhuǎn)動中，向轉(zhuǎn)鼓中的清液中緩慢加入(NH4)2SO4，使其濃度達到0.8-1.8mol/L，然后，用NaOH溶液調(diào)整清液的pH值至6.8-7.4，靜置8-18h； (10)酸溶解：用耐酸真空泵泵出上清液，棄之，留取沉淀物；轉(zhuǎn)動中，從轉(zhuǎn)鼓軸孔緩慢加入0.2-0.8MHAc溶液100-300重量份，轉(zhuǎn)動10-40min； (11)分級：將所得到的膠原蛋白溶液用去離子水稀釋1-5倍，通過0.2μm的微孔濾膜除去微粒，然后采用凝膠過濾色層分離法進行分級； (12)透析：分別將不同級分的膠原蛋白溶液倒入36mm透析袋，透析分子量10kD，先對0.04mol/L和0.02mol/L的磷酸二氫鉀或磷酸二氫鈉溶液透析2天，再對蒸餾水透析3天； (13)噴霧干燥：分別將不同級分的膠原蛋白溶液用0.2-0.8MHAc溶液溶解成濃度小于0.5wt％的稀溶液，在溫度低于60℃的條件下噴霧干燥，稱重包裝后密封干燥保存。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種醫(yī)用膠原蛋白粉的制備方法，其特點是采用純化豬皮為原料，經(jīng)預(yù)處理、分割、凍干、粉碎、浸酸，在溫度為4-15℃，用0.5-4.0wt％的復(fù)合酶皮膠原處理劑E消化4-12h，得到膠原蛋白的粗制品，再經(jīng)精制、分級、干燥，獲得高純度的醫(yī)用膠原蛋白粉劑。這種醫(yī)用膠原蛋白粉劑用于制備敷料膜、止血海綿、組織工程支架材料、藥物緩釋載體和醫(yī)用纖維。 |
| 國際公布 |
