公開(公告)號
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CN1952176A
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公開(公告)日
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2007.04.25
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申請(專利)號
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CN200610096455.3
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申請日期
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2006.09.27
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專利名稱
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從胸、腹水中提取游離mRNA的方法
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主分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分類號
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C12Q1/68(2006.01)I;C07H21/02(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計)人
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劉寶瑞;王立峰;錢曉萍
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地址
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210008江蘇省南京市中山路321號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京中新達(dá)專利代理有限公司
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代理人
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孫 鷗
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項
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從胸、腹水中提取游離mRNA的方法,其步驟在于: (1)將胸水或腹水注入有枸櫞酸鈉溶液的無RNA酶抗凝管中; (2)上離心機(jī)離心,吸取上清至新管,再離心,吸取三分之二上清至新管; (3)取上清加入到Trizol LS溶液中,室溫震蕩; (4)向其中加入氯仿,劇烈震蕩后室溫下放置; (5)上離心機(jī)離心,吸取水相層至新管; (6)加入異丙醇,沉淀RNA; (7)上離心機(jī)離心,75%乙醇洗滌后晾干; (8)加入無RNA酶水,溶解RNA,以其為模板,常規(guī)技術(shù)反轉(zhuǎn)錄為cDNA保存。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種從胸、腹水中提取游離mRNA的方法。本發(fā)明將胸或腹水注入有枸櫞酸鈉溶液的無RNA酶抗凝管中,離心,吸取上清,再離心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室溫震蕩,加入氯仿,劇烈震蕩后室溫下放置,離心,吸取水相層至新管,加入異丙醇,沉淀RNA,離心,75%乙醇洗滌后晾干,加入無RNA酶水,溶解RNA,以其為模板,常規(guī)技術(shù)反轉(zhuǎn)錄為cDNA保存。解決了過去無法從胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以對腫瘤及其他疾病進(jìn)行早期診治。操作方便,重復(fù)性強(qiáng)。
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國際公布
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