| 公開(公告)號 | CN1952179A |
| 公開(公告)日 | 2007.04.25 |
| 申請(專利)號 | CN200610140463.3 |
| 申請日期 | 2006.10.09 |
| 專利名稱 | 一種檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍總醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 田亞平;賈興旺;鄧心新;汪德清;董振南 |
| 地址 | 100853北京市復(fù)興路28號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京君智知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 |
| 代理人 | 向 華 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法，它包括下述步驟： (1)設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增含白介素-6基因-597G/A，-572G/C兩位點(diǎn)的DNA片段的引物： 正向引物：5’-AAAGGAGTCACACACTCC-3’； 反向引物：5’-GCGTTCCAGTTAATTTGTATTTG-3’； (2)設(shè)計(jì)分別用于檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-597G/A，-572G/C兩位點(diǎn)的探針，并用不同的熒光素分別標(biāo)記所述的兩對探針： 用于檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-597G/A位點(diǎn)的探針為： 檢測探針：5’-CTGCCTGGCCACCCTCA-3’； 錨定探針：5’-LC-Red 640-TTTCGTGCAGTTACTTCAAGGCGTCTCCAGG-3’； 用于檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-572G/C位點(diǎn)的探針為： 檢測探針：5’-ACAACAGCCCCTCACAGG-3’； 錨定探針：5’-LC-Red 705-GAGCCAGAACACAGAAGAACTCAGATGACTG-3’； (3)PCR擴(kuò)增，并進(jìn)行熒光檢測； (4)描繪熔點(diǎn)曲線； (5)根據(jù)得到的特征性熔點(diǎn)曲線，判斷待測樣品的基因型； (6)對所述的待測樣品的基因型進(jìn)行測序驗(yàn)證。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種檢測白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性位點(diǎn)的方法，它運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光PCR儀結(jié)合熔點(diǎn)分析在同一反應(yīng)體系中實(shí)現(xiàn)了同時(shí)對白介素-6基因啟動(dòng)子區(qū)-572G/C，-597G/A兩位點(diǎn)多態(tài)性的檢測。本發(fā)明所述的方法與直接測序的檢測方法相比，操作簡單，成本低廉，結(jié)果判斷直觀，反應(yīng)快速，并且每一反應(yīng)都是閉管進(jìn)行，有效減少了PCR污染的風(fēng)險(xiǎn)。 |
| 國際公布 |
