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一種低抗原性重組葡激酶突變體及制備方法

公開(公告)號 CN1948496A  
公開(公告)日 2007.04.18  
申請(專利)號 CN200510112695.3  
申請日期 2005.10.14  
專利名稱 一種低抗原性重組葡激酶突變體及制備方法  
主分類號 C12N15/57(2006.01)I  
分類號 C12N15/57(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;C12N9/50(2006.01)I;C12N9/68(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 徐東剛;王 旻;鄒民吉;蔡 欣;徐 濤;劉 深;王園園;王嘉璽  
地址 100850北京市海淀區(qū)太平路27號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 黃家俊  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項 一種低抗原性重組葡激酶突變體,其特征是: GGA AAA TAT AGA AAA GGC GAT GAC GCG AGT TAT TTT GAA CCA ACA GGC Gly Lys Tyr Arg Lys Gly Asp Asp Ala Ser Tyr Phe Glu Pro Thr Gly CCG TAT TTG ATG GTA AAT GTG ACT GGA GTT GAT GGT GCA GGA AAT GAA TTG CTA TCC CCT CGT TAT Pro Tyr Leu Met Val Asn Val Thr Gly Val Asp Gly Ala Gly Asn Glu Leu Leu Ser Pro Arg Tyr GTC GAG TTT CCT ATT AAA CCT GGG ACT ACA CTT ACA AAA GAA AAA ATT GAA TAC TAT GTC GAA TGG GCA Val Glu Phe Pro Ile Lys Pro Gly Thr Thr Leu Thr Lys Glu Lys Ile Glu Tyr Tyr Val Glu Trp Ala TTA GAT GCG ACA GCA TAT CAA GAG TTT AGA GTA GTT GCA TTA GCG CCA AGC GCA AAG ATC GAA GTC ACT Leu Asp Ala Thr Ala TyrGln Glu Phe Arg Val Val Ala Leu Ala Pro Ser Ala Lys Ile Glu Val Thr TAT TAT GAT AAG AAT AAG AAA AAA GAA GAA ACG AAG TCT TTC CCT ATA ACA GAA AAA GGT TTT GTT GTC Tyr Tyr Asp Lys Asn Lys Lys Lys Glu Glu Thr Lys Ser Phe Pro Ile Thr Glu Lys Gly Phe Val Val CCA GAT TTA TCA GAG CAT ATT AAA AAC CCT GGA TTC AAC TTA ATT ACA GCG GTT GTT ATA GAA CGT GCG Pro Asp Leu Ser Glu His Ile Lys Asn Pro Gly Phe Asn Leu Ile Thr Ala Val Val Ile Glu Arg Ala  
摘要 本發(fā)明屬突變或遺傳工程領(lǐng)域,本發(fā)明公開了一種葡激酶的低抗原性突變體的制備方法及用途。SAK的前6位基酸與溶栓活性無關(guān),但會影響其在一些原核細(xì)胞中的穩(wěn)定性。同時,其中35、74、80、82、130、135和136位氨基酸所在的區(qū)段具有多個B淋巴細(xì)胞表位,因此通過片段缺失、點突變等方法去除了SAK的前6位氨基酸,構(gòu)建了N端缺失、中間和C末端區(qū)段多點修飾的SAK突變體。該突變體的溶栓活性沒有明顯變化,而突變體的抗原性顯著降低。本發(fā)明的突變體適合于原核細(xì)胞中的表達(dá)和制備,給工業(yè)生產(chǎn)帶來了便利。由于其生物學(xué)活性與野生型相比沒有顯著差異,可用于溶解血栓,其抗原性降低的特點可能使其多次應(yīng)用成為可能。  
國際公布  
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