方法名稱: |
燈盞細辛--野黃芩苷含量測定--HPLC法 |
應(yīng)用范圍: |
燈盞細辛藥材中野黃芩苷的含量測定 |
方法原理: |
燈盞細辛經(jīng)50%乙醇超聲提取,提取液水溶解后以乙酸乙酯萃取,水層用流動相(乙腈-水-四氫呋喃-磷酸,15:85:1.5:0.1)溶解,經(jīng)液相色譜儀分離,在335nm處測定峰面積,外標法計算含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器設(shè)備 LC-10AD高效液相色譜儀,SPD-10A紫外可見檢測器,CLASS-LC10色譜工作站; 色譜條件 色譜柱:Hypersil-ODS 2(200mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈-水-四氫呋喃-磷酸(15:85:1.5:0.1);流速:0.8ml/min;檢測波長:335nm;柱溫:30℃。 |
試樣制備: |
對照品溶液的制備 精密稱定野黃芩苷對照品適量置50ml量瓶中,用甲醇溶解并定容,制成濃度為0.224mg/ml的溶液,搖勻,即得。 供試品溶液的制備 取干燥的藥材粉末約0.5g,精密稱定,置干燥錐形瓶中,用50%乙醇10ml超聲提取3次,每次20min,濾過,合并濾液,減壓揮干,用水30ml溶解并稱量轉(zhuǎn)移至125ml分液漏斗中,用乙酸乙酯萃取3次,每次30ml,棄去有機層,收集水層減壓揮干,用流動相溶解并定量轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中,定容,搖勻,即得。 |
操作步驟: |
分別精密對照品溶液與供試品溶液20μl,按上述色譜條件注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定,外標法計算樣品中燈盞乙素的含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
林燕芝,陳曉輝,唐星等.RP-HPLC測定燈盞細辛中野黃芩苷的含量.藥物分析雜志.2005,25(5):594-596 |