方法名稱: |
龍葵藥材-甾體類生物總堿含量測定-HPLC-UV |
應用范圍: |
用于龍葵藥材甾體類生物總堿含量測定 |
方法原理: |
本品加乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在210 nm處測定峰面積,外標法計算含量 |
儀器設備及實驗條件: |
儀器 液相- 質(zhì)譜聯(lián)用儀(SHIMADZU 2010A LC-MS),SPD-PDA檢測器(日本島津有限公司),澳洲茄胺標準品(北京豐斯特公司) 色譜條件 色譜柱:漢邦C18柱;流動相:乙腈/水(55:45,水相pH值用磷酸調(diào)節(jié)至2.7);流速:1.2ml/min;檢測波長:210 nm |
試樣制備: |
對照品溶液制備 無。 供試品溶液制備 1)龍葵甾體類生物總堿的提。悍蛛x稱取龍葵樣品,采用V[c(HCl)=2 mol/L]:V(乙醇)=1:4溶液潤濕24 h后,料液比按1 g:10 mL加入乙醇,在65 ℃的溫度下醇提兩次,每次4 h。過濾后合并濾液,濾液經(jīng)減壓蒸餾后得到黃綠色固體。用0.5 mol/L的HCl溶解后,用氯仿萃取三次,去氯仿層。水相用NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH為10.5,用氯仿萃取三次,合并氯仿萃取液,蒸干后用甲醇溶解并定容至50 mL,得到龍葵甾體類生物總堿的甲醇溶液。2)苷元澳洲茄胺的提。簩⒑摅w類生物總堿的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后,殘留物用40 mL V[c(HCl)=2 mol/L]:V(乙醇)=1:1溶液溶解,在100 ℃的溫度下水解,水解后將溶液中乙醇蒸餾去除,余液用氯仿萃取三次,取酸水層。經(jīng)NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH為10.5后,用氯仿萃取三次,合并氯仿萃取液,蒸干并用甲醇溶解,定容至50 mL,得到澳洲茄胺的甲醇溶液。 |
操作步驟: |
分別精密吸取澳洲茄胺對照液以及龍葵供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算澳洲茄胺含量。 |
附件: |
點擊下載 (解壓密碼:f1411.cn) |
備注: |
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參考文獻: |
蔣新宇,楊輝,趙宇.龍葵中甾體類生物總堿的含量測定. 食品科學.2006,27(08):224~226 |