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含苦參制劑—苦參及苦參湯有效部位—三葉豆紫檀苷—HPLC

  
方法名稱:
  含苦參制劑—苦參及苦參湯有效部位—三葉豆紫檀苷—HPLC
應用范圍:
  本方法適用于苦參及苦參湯有效部位中三葉豆紫檀苷含量的測定
方法原理:
 本品有效部位加50 %甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在310 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器    Waters 515高效液相色譜儀,Waters 2487紫外檢測器,WatersMillennium32色譜工作站,25 μL可調(diào)進樣器

色譜條件    色譜柱:Phenomenex LunaC18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:乙腈-磷酸水溶液{磷酸∶水(2∶530)}(26∶74);流速:1.0 mL/min;檢測波長:310 nm;柱溫:室溫
試樣制備:
 

對照品溶液的制備   精密稱取干燥至恒重的三葉豆紫檀苷4.04 mg,置100 mL量瓶中,加甲醇溶解后稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。

供試品溶液的制備   按苦參湯處方單味藥比例,稱取苦參、黃芩、生地黃一定量,混勻,用稀乙醇回流提取。乙醇提取液減壓回收溶劑,殘留物加水分散,通過大孔吸附樹脂柱,樹脂柱水洗去雜后,用稀乙醇洗脫。乙醇洗脫液回收溶劑,殘留物減壓干燥,得苦參湯有效部位。精密稱取苦參湯有效部位約20 mg,置25 mL錐形瓶中,精密加入50 %甲醇10 mL,超聲溶解。溶解液通過中性化鋁柱4 g,用50 %甲醇30 mL洗脫,收集洗脫液,減壓回收溶劑殘留物加甲醇4 mL溶解,用0.45 μm微孔濾膜濾過,作為供試品溶液。
操作步驟:
  分別精密吸取對照液以及供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:f1411.cn)
備注:
 
參考文獻:
  劉斌,石任兵,朱麗君等.HPLC法測定苦參及苦參湯有效部位中三葉豆紫檀苷的含量.北京中醫(yī)藥大學學報. 2006.29(6):412~414,418
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