萬氏牛黃清心丸-梔子苷-高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定萬氏牛黃清心丸中梔子苷的含量。

本方法適用于中成藥萬氏牛黃清心丸。

供試品加甲醇超聲，濾過，用高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長238nm處檢測梔子苷的吸收值，計算其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙腈（色譜純)

3.水為重蒸水

4.梔子苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑，Kromasil C₁₈(250×4.6mm，5um)，理論板數(shù)按梔子苷計應(yīng)符合規(guī)定。

1.3可變波長紫外檢測器

1.4 色譜工作站

1.5 超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋乙腈＝10＋90

2.2流速：1.0ml/min

2.3檢測波長：238nm

2.4 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含0.298mg的溶液，即得對照品溶液。精密量取梔子苷對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分別置于5ml 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2. 供試品溶液的制備

取本品10g，研細(xì)，過20目篩，精密稱取約1.2g，置于50mL具塞錐形瓶中，加甲醇25mL，密塞，稱定重量。超聲處理20min，放冷至室溫，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻。精密量取溶液10mL分別置于25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得供試品溶液。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密吸取20ul，注入液相色譜儀，測定峰面積，以進(jìn)樣量X為橫坐標(biāo)，峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線�；貧w方程為：ｙ=494747X-1511.3，r=0. 9997(n=5)，線性范圍為0.596-2.980mg。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀測定峰面積，外標(biāo)法計算梔子苷的含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

盧興紅，張?zhí)m桐，反相高效液相色譜法測定梔子及其制劑中梔子苷的含量，中國藥房，2003，14(12)：748～750。