黃連上清丸—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

將供試品加甲醇鹽酸加熱，超聲提取，提取液加甲醇過濾，濾液作為供試品液。精密吸取對照品溶液和供試品液，分別注入液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測大黃酸吸收值，以外標(biāo)法計算含量。

1. 乙腈（色譜純)

2. 0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液

3. 0.025mol/L十二烷基硫酸鈉溶液

4. 鹽酸

5. 甲醇

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

YWG - C₁₈ 柱 (250 × 4.6mm，5µm)

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：

乙腈 0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液 0.025mol/L十二烷基硫酸鈉溶液 = 50 25 25

2.2 流速：1.3mL/min

2.3 檢測波長：265nm

2.4 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱定鹽酸小檗堿對照品適量，加鹽酸-甲醇(1:100)溶液溶解并制成每1mL含鹽酸小檗堿0.04mg的對照品溶液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品0.0109g，置100mL量瓶中，加鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液溶解并定容，搖勻。精密量取此溶液2mL置5mL量瓶中，加鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置具塞錐形瓶中，精密加人鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液25mL，稱定重量，置50°C水浴中加熱15min，放冷，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液1、5、10、15、20、25µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣量對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

精密吸取對照品溶液和供試品液各10µL，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以外標(biāo)法計算出其含量。

黃萍，羅鳳琴. HPLC測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量. 華西藥學(xué)雜志，2003，18(2)：139-140.