方法名稱： |
五味香連丸—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法 |
應用范圍： |
本方法適用于中成藥五味香連丸。 |
方法原理： |
供試品于具塞錐形瓶中，加甲醇加熱回流提取，濾過，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解后，濾過，濾液注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量。 |
試劑： |
甲醇（色譜純) |
儀器設備： |
1儀器 1.1高效液相色譜儀 1.2色譜柱 SinoChromODS-AP(4.6mm×150mm,5μm) 1.3紫外吸收檢測器 2色譜條件 2.1流動相：甲醇 0.05mol/L磷酸二氫鉀 = 28 72 2.2檢測波長：254nm 2.3流速：1.0mL/min |
試樣制備： |
1.稱取供試品 取五味香連丸100粒，研細，精密稱取1g。 2.對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量加甲醇制成60μg/mL的鹽酸小檗堿對照品溶液。 3.供試品溶液的制備 將供試品置具塞錐形瓶中，加甲醇50mL，加熱回流1h，濾過，洗滌容器及殘渣，合并 濾液和洗液，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解，定量轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標準曲線繪制 精密吸取鹽酸小檗堿對照品溶液2、5、7.5、10、12.5、15μL，注入高效液相色譜儀，以峰面積積分值對鹽酸小檗堿的量進行回歸，繪制標準曲線。 2.供試品溶液的測定 精密吸取上述供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處測定鹽酸小檗堿的峰面積積分值，用外標法計算出小檗堿的含量。 |
參考文獻： |
肖慧，鐘瑜.HPLC法測定五味香連丸鐘鹽酸小檗堿的含量.廣東藥學院學報，2004，20(6):597-598 |
