復方黃連素片—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中藥制劑復方黃連素片。

供試品于量瓶中，加沸水溶解，放冷，濾過，濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長263nm處檢測鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量。

1. 乙腈（色譜純)

2. 磷酸二氫鉀

3. 庚烷磺酸鈉

4. 磷酸

5. 三乙胺

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Nova-pak C₁₈色譜柱（250×4.6mm)（大連依利特公司)，理論板數按鹽酸小檗堿峰計算為8998。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 磷酸鹽緩沖液[0.05mol/L磷酸二氫鉀和0.05mol/L庚烷磺酸鈉(1:1)]，= 40 60（含0.2%三乙胺)，用磷酸調pH3.0。

2.2 檢測波長：263nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品去糖衣后研細的藥粉（過五號篩-80目)適量（約相當于鹽酸小檗堿40mg)。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品10.0mg，置100mL量瓶中，加30%乙醇至刻度，混勻，精密量取2mL置10mL量瓶中，加沸水適量使溶解并稀釋至刻度，混勻，制成每1mL含鹽酸小檗堿0.1mg的儲備溶液。

3. 標準溶液的制備

精密量取對照品儲備溶液6，8，10，12，14mL，加水定容至25mL量瓶中，搖勻，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置100mL量瓶中，加沸水適量使溶解并稀釋至刻度，混勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 標準曲線繪制

精密吸取上述標準溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長263nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以進樣量對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長263nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，計算出其含量。

林紹樂，游貴君，鄭純. 中國藥典2000年版一部復方黃連素片含量測定方法的改進. 海峽藥學，2003，15（5)：57-58.