復(fù)方地芬諾酯片—鹽酸地芬諾酯和硫酸阿托品的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方地芬諾酯片中鹽酸地芬諾酯和硫酸阿托品的含量。

本方法適用于復(fù)方地芬諾酯片。

供試品經(jīng)固相萃取柱分離后，收集的部分進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)230nm和206nm處檢測(cè)鹽酸地芬諾酯和硫酸阿托品的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2. 三乙胺磷酸溶液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

鹽酸地芬諾酯：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸地芬諾酯計(jì)算不低于2000。

硫酸阿托品：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按硫酸阿托品計(jì)算不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相

鹽酸地芬諾酯：三乙胺磷酸溶液 乙腈=45 55，并調(diào)節(jié)pH至3.1±0.2

硫酸阿托品：三乙胺磷酸溶液 乙腈=85 15，并調(diào)節(jié)pH至5.8±0.2

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)

鹽酸地芬諾酯：230nm

硫酸阿托品：206nm

2.3 柱溫：室溫

1. 三乙胺磷酸溶液

取三乙胺4mL，加水500mL，磷酸2mL，加水至1000mL，混勻，即得。

2. 稱取供試品

鹽酸地芬諾酯：取本品50片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約適量（約相當(dāng)于鹽酸地芬諾酯2.5mg)。

硫酸阿托品：取上述細(xì)粉，精密稱取約適量（約相當(dāng)于硫酸阿托品0.5mg)。

3. 對(duì)照品溶液的制備

鹽酸地芬諾酯：精密稱取鹽酸地芬諾酯對(duì)照品適量，用流動(dòng)相溶解并制成每1mL約含嗎啡0.05 mg的溶液。

硫酸阿托品：取硫酸阿托品對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相溶解并稀釋成每1mL約含0.01 mg的溶液。

4. 供試品溶液的制備

鹽酸地芬諾酯：將上述供試品置于50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，充分振搖使鹽酸地芬諾酯溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。

硫酸阿托品：將上述供試品置于50mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，充分振搖使硫酸阿托品溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)230nm和206nm處測(cè)定鹽酸地芬諾酯和硫酸阿托品的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.425。