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注射用三磷酸腺苷二鈉—總核苷酸的測(cè)定—分光光度法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 注射用三磷酸腺苷二鈉—總核苷酸的測(cè)定—分光光度法
方法名稱:
注射用三磷酸腺苷二鈉—總核苷酸的測(cè)定—分光光度法
應(yīng)用范圍:

本方法采用分光光度法測(cè)定注射用三磷酸腺苷二鈉中總核苷酸的含量。

本方法適用于注射用三磷酸腺苷二鈉。

方法原理:

供試品加0.1mol/L磷酸緩沖液制成供試液,置紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),于259nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,計(jì)算出其含量。

試劑:

磷酸緩沖液(0.1mol/L)

儀器設(shè)備:
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
試樣制備:

1.磷酸緩沖液(0.1mol/L)

取取磷酸氫二鈉35.8g,加水至1000mL,無(wú)水磷酸二氫鉀13.6g,加水至1000mL,二液互調(diào)pH值至7.0.

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量,加0.1mol/L磷酸緩沖液使溶解并制成每1mL中含20µg的溶液,即得供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

取供試品溶液照紫外分光光度法,于波長(zhǎng)259nm處測(cè)定吸收度,按C10H14N5Na2O13P3的吸收系數(shù)(E1%1cm)為279計(jì)算,即得。

注:分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照,采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng),一般供試品的吸收度讀數(shù),以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇,應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù),再計(jì)算含量。

參考文獻(xiàn):

中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部,p.25。

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