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1.2 方法 標本離體后分成腎癌組織組、癌旁組織組、正常腎組織組，每組8例，均用10%的甲醛固定48 h，石蠟包埋5 μm切片，同時應用免疫組織化學(immunohistochemistry)方法觀察細胞增殖標記物增殖細胞核抗原(PCNA)的表達變化，探討PCNA的表達與腎癌的關系。所有標本均在Motic Med 6.0數碼醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)內在相同的放大倍數(400)下，每個組計數30個視野中的總細胞數和陽性細胞數，計算增殖細胞的百分比，作為增殖指數(proliferation indx，PI)。
1.3 腫瘤分期標準 Ⅰ期:腫瘤局限在腎包膜內。Ⅱ期:腫瘤穿破腎包膜侵犯腎周圍脂肪組織，但局限在腎周圍筋膜以內。Ⅲ期:腫瘤侵及區(qū)域淋巴結，或(和)腎靜脈、腔靜脈。Ⅳ期:腫瘤侵犯附近器官或遠處轉移。
1.4 統(tǒng)計學分析 計量資料以±s表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
PCNA免疫組化染色: 正常腎組織內的細胞核有弱陽性表達，細胞核內有弱棕黃色顆粒顏色，癌旁陽性表達輕度增加，細胞核內的棕黃色顆粒顏色高于正常腎組織，腎癌組織陽性表達明顯增多，細胞核內棕黃色顆粒顏色明顯加深, 明顯高于癌旁組織(圖1～3)，正常腎組織組與腎癌組、癌旁組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。腎癌4個期之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)�！”�1 PCNA在腎癌組織、癌旁組織和正常腎組織表達比較注：與對照組比較，^P<0.01
3 討論
PCNA是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，其合成明顯與細胞周期有關：靜止期細胞內含量很少，G1晚期開始大幅度增加，S期達到高峰，G2M期明顯下降，其量的變化與DNA合成一致[3]。PCNA是反應細胞增殖分數和所處周期的客觀指標[4]。目前也是腎癌標記物熱點研究之一[5]醫(yī).學全.在.線網站f1411.cn。
腎癌細胞的生物學行為與癌細胞的增殖活性密切相關，PCNA是一種僅在增殖狀態(tài)細胞內出現(xiàn)的非組蛋白型核蛋白。PCNA的表達越高說明DNA復制活躍程度增加，它是反映細胞增生的一項重要指標。我們的實驗顯示：PCNA在正常腎組織、癌旁組織和腎癌組織中陽性表達不同，3組兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義，說明PCNA在腎透明細胞癌發(fā)生過程中起著重要作用，并且可以作為腎透明細胞癌診斷的一種參考指標。另外PCNA的活躍程度也反映了腎透明細胞癌的發(fā)生狀態(tài)。
關于PCNA在腎透明細胞癌不同分期表達差異性的研究，目前還不完全一致，多數認為PCNA表達顯著相關于高分期[6]，但少數研究結果認為PCNA表達與分期無相關關系[7]，我們的數據顯示PCNA在正常腎組織、癌旁組織及腎癌組織之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而在腎癌組織4個分期之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
實驗表明，腎癌組織PCNA表達增加，癌旁組織輕度增加，正常腎組織也有一定表達，但明顯少于腎癌組織，表明增殖過度可能導致腎癌病變的發(fā)生。
【參考文獻】
1 王亦興，朱芳高，王立富.腎癌術前化療性栓塞療效評價.河北醫(yī)藥，2008，30：18791880.
2 柯莽，周濤，王天濟，等.應用組織片在研究人腎癌中Survivin、EGFR和PCNA的表達與預后的關系.浙江臨床醫(yī)學，2007，9：15901592.
3 陳學軍,高劍波,周志剛，等.螺旋CT征象與增殖細胞核抗原表達間關系.醫(yī)藥論壇雜志，2007，28：79.
4 莫蕾，王海林，李勇，等.早期腎癌MSCT灌注成像與VEGF、PCNA表達關系的研究.廣州醫(yī)藥,2007，38：1315醫(yī).學全.在.線網站f1411.cn.
5 湯中林，李如昌，陳剛，等.CD44v6和PCNA在腎透明細胞癌的表達及其預后價值.現(xiàn)代泌尿外科雜志，2004，9:1214.
6 吳劍平，陳明，孫則禹.腎癌組織中CD40/p53/PCNA表達的研究.廣西醫(yī)學，2008，30：12981299.
7 Haitel A, Wiener HG, Migschitz B,et al. Proliferating cell nuclearantigen and MIB21. An alternative to classic prognostic indicators in renalcell carcinomas. Am J Clin Pathol,1997,107:229235.
