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乙肝大三陽患者317例HBV DNA定量檢測結果分析
【關鍵詞】 PCR HBV DNA 定量 大三陽 拷貝/ml
聚合酶鏈反應(PCR)測定現(xiàn)已用于，如病毒性肝炎治療的動態(tài)觀察。本文通過對我科317例乙肝五項大三陽患者HBV DNA定量檢測中3例病毒量<103拷貝/ml的樣本進行糾正，分析PCR定量檢測拷貝數(shù)明顯偏低的原因，報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇我科2007年3月至2008年2月乙肝五項為大三陽的患者371例進行HBV DNA定量檢測。
1.2 方法 檢測使用SLAN熒光定量擴增儀，復星乙型肝炎病毒(HBV)核酸擴增(PCR)熒光定量檢測試劑盒。該試劑盒對HBV的檢測靈敏度為103拷貝/ml, 檢測范圍為103～108拷貝/ml。由專業(yè)技術人員嚴格按操作規(guī)程進行檢測。 1.3 判斷HBV復制的標準 HbeAg陽性和HBV DNA拷貝定量檢測病毒含量＞105/ml［1］。這說明病毒復制能力強，有較高的傳染性醫(yī)學全.在線f1411.cn。
1.4 統(tǒng)計學分析 計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結果
2.1 317例HBV DNA定量檢測結果 全部病例中，314例 (99.05%) HBV DNA定量檢測病毒含量＞105拷貝/ml,僅3例 (0.95%)HBV DNA定量檢測病毒含量＜103拷貝/ml，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
2.2 將HBV DNA定量檢測病毒含量＜103拷貝/ml的3例患者標本調(diào)整后再次檢測結果 將此3例標本放置4 d后稀釋10倍重新檢測，2例再次檢測病毒含量分別為3.74×106拷貝/ml和7.13×105拷貝/ml。而另1例再次檢測結果同前，經(jīng)分析考慮可能為病毒變異，更換科華公司的HBV DNA定量檢測試劑盒后檢測，其病毒含量為2.63×105拷貝/ml。
3 討論
HBV DNA定量檢測靈敏度高、特異性強，可反映病毒在體內(nèi)活動能力，對指導臨床治療及判斷預后具有重要意義。但由于PCR是對原始待測模板核酸的一個擴增過程，任何干擾PCR指數(shù)擴增的因素如擴增儀空間溫度有差異、臨床標本中Taq酶抑制劑的存在都會影響擴增產(chǎn)物的量，不能對原始模板準確定量，使得PCR擴增終產(chǎn)物的數(shù)量與原始模板數(shù)量之間沒有一個固定的比例關系。通過檢測擴增產(chǎn)物很難對原始模板進行準確定量［2］。因此，如何消除各種影響PCR準確定量的因素，成為PCR檢測價值的關鍵。
