診斷學(xué)-實(shí)習(xí)指導(dǎo):實(shí)習(xí)二十三 肝臟功能檢查

實(shí)習(xí)二十三  肝臟功能檢查

    一、目的要求  

   （一)了解膽紅素代謝功能試驗(yàn)，血清蛋白質(zhì)測定，血清蛋白電球。血清轉(zhuǎn)氨酶測定的基本原理。

(二)掌握阻塞性黃疽、肝細(xì)胞性黃疽及溶血性黃疽的實(shí)驗(yàn)室區(qū)別。

(三)掌握常用肝功能檢查正常值臨床意義和選用原則。

二、見習(xí)方法

(一)輔導(dǎo)教師講解重點(diǎn)及注意事項(xiàng)。

(二)學(xué)生按實(shí)習(xí)指導(dǎo)要求進(jìn)行尿膽紅素、尿膽原，血清膽紅素測定。

(f1411.cn/jianyan/三)討論、總結(jié)。

三、見習(xí)用具

     白工作衣自備，其它用具由實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備。

四、見習(xí)內(nèi)容

(一)尿膽紅素試驗(yàn)Harrison法

原理：

  用氯化鋇吸附尿液中膽紅素后，滴加酸性三氯化鐵試劑，使膽紅素氧化成膽綠素而呈綠色反應(yīng)。

試劑：

l、Fouchet試劑——酸性三氯化鐵試劑

稱取三氯乙酸25g，加蒸餾水少許溶解，再加入三氯化鐵0.9g，溶解后加蒸餾水至lOOml。

2、100g／L氯化鋇溶液：

操作：

1、取尿液約f1411.cn/rencai/5ml，加100g/L氯化鋇溶液3～5滴，此時出現(xiàn)白色沉淀物。

2、將上述渾濁尿離心后，棄去上清液，留離心沉淀物在管底，加入Fouchet試劑九滴，輕輕彈動試管。呈綠、藍(lán)色反應(yīng)者為陽性，否則為陰性。

尿膽紅素試驗(yàn)試紙法：

原理、操作、結(jié)果判斷(參閱“目測八聯(lián)試紙法”)

(二)尿膽原定性檢查

1、原理

尿膽原在酸性溶液中可和Ehrlich氏醛試劑中的對二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應(yīng)而形成櫻桃紅色化合物。

2、用具和試劑

Ehrlich醛試劑，5毫升吸管1支，10毫升小試管3支，蒸餾水。

3、操作方法：

  (1)取3支小試管，編成1：10、1：20、1：40。

  (2)第一管放蒸餾水4.5毫升，以下每管放蒸餾水2毫升。

  (3)第一管放入被檢小便0.5毫升，吸吹3次混勻，吸出3毫升，放2豪升入第二管，余1毫升棄去，在第二管吸吹3次，吸2毫升于第三管，吸吹3次，棄去2毫升。

   (4)每管加Ehrlich試劑4滴，然后自管口向下觀察，以最高稀釋度的一管仍呈陽性反應(yīng)者為終點(diǎn)管并記錄之。(如陰性，記錄最濃一管，如陽性則記錄最稀一管)。

4、正常值及臨床意義

正常值：正常情況下，每24小時由尿排出的尿膽原少于3.5mg/L，一般定性試驗(yàn)呈弱陽性反應(yīng)，其陽性稀釋廈應(yīng)在1：20以下。

臨床意義

①肝細(xì)胞性黃疸時，由于受損細(xì)胞不能將從腸道重吸收的尿膽原充分氧化為膽紅素再排入腸道，因而經(jīng)體循環(huán)由尿排出的尿膽原增多。在急性肝炎病人有時其他試驗(yàn)尚屬正常時，尿中尿膽原含量即已增多，因此，它是一個較為敏感的肝功能試驗(yàn)。病毒性肝炎的早期尿膽原增高，在黃疽的極期，可因膽紅素排入腸道的量減少，而使尿中尿膽原減少。

②溶血性黃疸時，膽紅素形成增多，由腸道吸收的尿膽原亦隨之增多，故尿中尿膽原增高。溶血引起肝細(xì)胞功能損傷時，也能引起尿中尿膽原增多。

③阻塞性黃疸時，尿中尿膽原可消失，如連續(xù)數(shù)天尿中無尿膽原，提示可能是由于惡性腫瘤引起了膽道完全阻塞。膽石引起的阻塞性黃疸呈間歇性的尿膽原消失或減少。

④肝硬變及中毒引起的肝損害，尿膽原試驗(yàn)常為陽性。

⑤此外，發(fā)熱、心功能不全、便秘等亦可使尿膽原稍高。

(二)試紙法

原理、操作、結(jié)果判斷，參閱“目測八聯(lián)試紙法”

三、尿膽素檢驗(yàn)

尿膽素的臨床意義與尿膽原同。

肝功能檢查

血清總膽素和直接膽紅素測定

化驗(yàn)原理

Bilirubin(Direct)+Diazotized →sulfanic acid Azobilirubin

Bilirubin(Total)+Diazotized sulfanic Acid Azobilirubin

Azobilirubin在540nm波長有特定吸收峰

    試劑

1、鹽酸試液：HCL0.1N·1×240ml

2、咖啡因試液(Caffeine Reagent)：Caffeine 0.128mole／L·1×240ml

3、苯磺酸試劑：sulfanic acid7.1mmole／L·8×15ml

4、亞硝酸鈉試劑：sodium nitrite 25 mmole／L·1× lOml

5、膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液：Biliurbin 10mg／dl(171 umole／L)·2ml

    檢驗(yàn)注意事項(xiàng)

1、采取新鮮未溶血之血清。

2、室溫下須于2小時內(nèi)完成化驗(yàn)。

3、2～5℃下亦須于12小時內(nèi)完成化驗(yàn)。

化驗(yàn)方法

取1.25ml亞硝酸鈉試液加人苯礴酸試液配成偶氮試液，可穩(wěn)定7天(2-8℃蔽光下)

溫度：25or30℃

※測直膽紅素時，空白對照要以鹽酸試劑代替咖啡因試劑。

計算

Factor=標(biāo)準(zhǔn)液濃度（171)

標(biāo)準(zhǔn)液吸光值

總膽紅素=總膽紅素吸光值×Factor

直接膽紅素=直接膽紅素吸光值×Factor

間接膽紅素=總膽紅素-直接膽紅素

正常值

成人總膽紅素：0.3～1.2mg/dl(5.13～20.52umole/l)

直接膽紅素：<0.2mg/dl(3.42umole/l)

間接膽紅素：0.2～0.7mg/dl(3.42～11.97umole/l)

適用范圍

線性界限：20mg/dl(342umole/l)

總膽紅素若超過20mg/dl(342umole/l)時，需以生理鹽水稀釋后再測試，結(jié)果再  

乘稀釋倍數(shù)。