黑素細胞及其腫瘤

　　一、正常黑素細胞

　　人類黑素細胞主要分布于表皮基底層。表皮黑素細胞起源于神經嵴。HE染色的切片中，黑素細胞核小濃染，胞漿透明，約10個基底細胞中可見一個。能確定黑素細胞的方法有透射電鏡觀察及多巴染色。免疫細胞化學染色目前僅以抗S-100蛋白抗體著染有一定參考意義，根據其位于基底層一般可判斷其系黑素細胞，但有時Langerhan氏細胞也可存在于基底層，而且我們在應用中還發(fā)現，不少皮內痣未累及表皮的黑素細胞作S-100蛋白染色時，表皮基底層未能顯示陽性的黑素細胞。中間絲系列中，黑素細胞波形纖維蛋白陽性。此外，黑素細胞尚可表達黑素小體相關抗原（HMSA)、一些神經苷酯、P97等黑素瘤相關抗原，但極微弱。

　　二、色素痣

　　色素痣可表達與黑素細胞相同的抗原，且通常較強。1987年Nakanish等曾克隆出一析僅與色素痣而不與正常黑素細胞及黑素瘤細胞反應的單抗TNKH₁，由于未見進一步的研究，尚不能認為色素痣中存在一種特異抗原。

　　三、惡性黑素瘤

　　惡性黑素瘤主要起源于表皮黑素細胞，少數起源于色素痣、真皮等。在黑素細胞及其腫瘤中，表皮黑素細胞最為成熟，除分化抗原外，表達的抗原少，色素痣特別是交界痣處于較低的增殖狀態(tài)，表達的抗原較多，惡性黑素瘤分化最低，增生活躍，除能表達正常黑素細胞及痣細胞所表達的抗原外，尚能表達一些特殊的黑素瘤相關抗原，或表達強度遠高于正常黑素細胞及痣細胞。

　　近10余年來，已克隆出許多株黑素瘤相關抗原的抗體，但至今尚未發(fā)現一種真正的黑素瘤特異抗原，有的單抗雖具有很高的特異性及敏感性，如兩伯稱2-139-1及6-26-3的單抗，黑素瘤陽性率26/26，呈強陽性或中度陽性，22例色素痣僅1列交界痣可疑陽性，然而近10年的文獻跟蹤未見進一步的深入研究。

　　在眾多的黑素瘤相關抗原中，以P97、神經節(jié)　苷酯、HMB₄₅研究得較深入。診斷應用中應用最多的是HMB₄₅,Gown等以ABC法觀察了60例惡性黑素瘤，僅2例陰性，交界部痣細胞陽性6例，皮內痣及30種168例非黑素細胞性腫瘤全部陰性。最近的免疫電鏡觀察顯示，HMB₄₅抗原定位于黑素化不完全的黑素小體或稱異常黑素小體上。由于大樣本量的電鏡觀察發(fā)現少數先天性痣的皮內痣中可以有異常黑素小體，另一方面少數黑素瘤中不一定存在異常黑素小體，所以應用HMB₄₅時，除需注意交界部的陽性對黑素細胞腫瘤的良惡性鑒別無意義外，皮內損害中的陽性與陰性亦應結合HE切片進行分析。醫(yī).學全.在.線網站f1411.cn

　　神經節(jié)　苷酯（Ganglioside)是一類帶唾液酸的鞘糖酯，按糖基中唾液酸的數目分為單、二、三、四唾液酸神經節(jié)　苷酯，分別簡稱GM、GD、GT和GQ，每種神經節(jié)　苷酯還可根據薄板層析遷移率Rf值的大小再分幾個亞類，如GD₁、GD₂、GD₃等。神經組織、黑素細胞等含很微量神經節(jié)　苷酯，細胞惡變過程中往往伴有神經節(jié)　苷酯的改變，其改變程度與腫瘤的惡性程度和轉移有關。黑素瘤細胞表達大量GD₃、GM₃，25%原發(fā)和50%轉移性黑素瘤還表達GD₂。研究表明，惡性黑素瘤與正常黑素細胞所表達的神經節(jié)　苷酯的結構是相同的，一些神經節(jié)　酯的單抗只與黑素瘤結合，不與正常黑素細胞、神經組織結合，可能是由于含量的差異所致，另外可能與神經節(jié)　苷酯在細胞表面的暴露程度有關。GM₃已被稱為黑素瘤的跨種抗原，但GD₃較GM₃更具特異性，因兩者在正常黑素細胞中的比值GM₃：GD₃為18：1，在黑素瘤中GM₃：GD₃為1：15。

　　目前針對神經節(jié)　苷酯的單抗有數10株，各株的抗原結合特性有一定差異，較早的一株名為R₂₄的抗原為GD₃，除與黑素瘤、星形細胞瘤反應外，與其它一些惡性腫瘤及少數正常組織亦有反應。國內引進的一株名為Mel₃的雜交瘤所針對的抗原為GD₂、GT₃、GD₃、GQ₁₆，10例黑素瘤組織細胞100%強陽性或中度陽性，4/7例色素痣的部分細胞弱陽性或中度陽性，4/14例表皮黑素細胞呈極弱反應，胎肝以外的其它胚胎組織陰性。田芳等用該單抗所染結果與前述相類似。

　　P₉₇抗原是一膜結合的轉鐵蛋白樣分子，黑素瘤細胞膜上含量很高�，F已克隆出P₉₇分子cDNA并制備成分子疫苗，但應用前景尚不明。對P₉₇的研究主要是應用放免法，很少應用免疫組化方法。

　　S-100蛋白、波形纖維蛋白雖不象一些黑素瘤相關抗原那樣具有高特異性，但其應用范圍廣，易獲得，所以此二種蛋白的抗體在黑素瘤鑒別診斷中應用最普遍。我們對68例病理確診或疑診的黑素瘤組織進行染色，結合抗角蛋白抗體標染，HE切片觀察等，否定了11例的診斷，余57例S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽性。根據此觀察，筆者認為：在HE切片觀察基礎上，排除一些神經性腫瘤、組織細胞增生癥X、色素痣，S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽性，能肯定惡性黑素瘤診斷，兩抗體均陰性能否定診斷。

　　NSE在黑素瘤中的表達率較低，染色弱，在黑素瘤鑒別診斷中實用意義不大。