三、微生物學(xué)診斷
乙腦早期快速診斷通常采集性期患者血清或腦脊液特異性lgm ,也可做RT—PCR檢測標(biāo)本中的病毒核酸片段,一般6個小時內(nèi)可初步報告結(jié)果。常規(guī)血清學(xué)試驗,(H1、CF、NT)需取雙份血清,同時做對比試驗,當(dāng)恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期≥4倍時,有輔助診斷意義,可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦患者病毒血癥期短,直接檢出病毒抗原或分離病毒陽性率低,較少用于診斷試驗。
。ㄒ)特異性lgM檢測
乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM ,病后2~3周達(dá)到高峰,故單份血清可做出早期診斷?墒褂茫孩賚gM 捕捉ELISA法(見23章); ②2ME—NI法,血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中,將早期單份血清分成二份,一份用2巰基乙醇(2ME)處理,以破壞lgM ,另一份不處理,然后同時做HI試驗,若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍,則為lgm 陽性; ③微量間接免疫熒光法,用熒光素標(biāo)記的抗u鏈血清,檢測已與細(xì)胞抗原片結(jié)合的lgM,根據(jù)特異性熒光顆粒,判斷血清標(biāo)本中的lgM存在。
。ǘ)常規(guī)血清學(xué)試驗
1.血凝抑制試驗對乙腦診斷而言,本法特異性較低,但敏感性高,簡便易行。常用于病毒的初步鑒定,確定有無乙腦病毒存在。檢測血清標(biāo)本中的HI抗體,多采用2ME—HI法。
2.補體結(jié)合試驗 補體結(jié)合抗體僅存在于lgg 中,病后出現(xiàn)遲,消失快,適用于診斷近期感染。
3.中和試驗 抗體存在于lgG、 lgM中,出現(xiàn)早,維持久。中和試驗特異性和敏感性都高,但操作繁雜,需用大量動物或組織培養(yǎng)管,需時較久,不適于臨床診斷常規(guī)使用,而在血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查和病毒鑒定上有價值。醫(yī).學(xué).全.在.線網(wǎng)站f1411.cn
。ㄈ)病毒分離與鑒定
取病尸腦組織研磨成10%懸液,接種1-3日齡乳鼠腦內(nèi),待發(fā)病頻死時,取腦懸液,用單克隆抗體做中和試驗鑒定病毒。也可接種敏感細(xì)胞(如C6/36細(xì)胞系)分離病毒。
四、特異防治
(一)特異預(yù)防
現(xiàn)用的乙腦滅活疫苗是用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)增殖,甲醛滅活制成,初次免疫時,皮下注射2~3次,間隔7-10天,以后每年加強注射一次,免疫力維持半年左右,保護(hù)率達(dá)66-90%。我國已篩選出乙腦病毒減毒株,用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)制成減毒活疫苗,只需皮下注射一次,安全有效,目前正作現(xiàn)場觀察。疫苗接種對象是10歲以下兒童和來自非疫區(qū)的軍民。流行區(qū)當(dāng)年飼養(yǎng)的仔豬接種乙腦疫苗,以杜絕傳染來源,也可使豬健康成長。
防蚊滅蚊是預(yù)防本病的有效措施。
(二)特異治療
目前乙腦治療仍采用對癥處理及支持療法,有報道用病毒唑、干擾素、恢復(fù)期血清等治療,可能減輕病勢,但已出現(xiàn)腦炎癥狀者,則無治療效果。我國采用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù),制備出高中和活性乙腦單克隆抗體,經(jīng)系統(tǒng)動物實驗治療證明安全有效,95年經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)進(jìn)入Ⅰ、Ⅱ 期臨床試驗,是一種特異免疫治療制劑。